不同产地蚕蛹的HPLC指纹图谱研究及多组分含量测定

作者：郑倩倩; 王小芳; 路丽娟; 张淼; 赵艳普

来源：中国药房, 2021, 32(14): 1747-1751.

• 蚕蛹
• 高效液相色谱法
• 指纹图谱
• 含量测定
• 核苷类成分

目的:建立蚕蛹指纹图谱和多组分含量测定方法,为全面评价蚕蛹的质量提供参考。方法:以不同产地的18批蚕蛹为样品,采用高效液相色谱法(HPLC)进行测定。色谱柱为资生堂CAPCELL PAK C18AQ S5,流动相为甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(梯度洗脱),检测波长为260 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,进样量为10μL。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012年版)》进行HPLC指纹图谱分析及相似度评价,并通过与对照品色谱图比对进行色谱峰的指认;测定蚕蛹样品中尿嘧啶、鸟嘌呤、黄嘌呤、尿苷等4个核苷类成分的含量。结果:在18批蚕蛹样品的HPLC指纹图谱中确定了16个共有峰,指认了3号峰为尿嘧啶、6号峰为鸟嘌呤、7号峰为黄嘌呤、8号峰为尿苷;各样品图谱与对照指纹图谱的相似度为0.912～1.000。尿嘧啶、鸟嘌呤、黄嘌呤、尿苷分别在5.34～534、5.28～528、5.06～506、5.195～519.5μg/m L质量浓度范围内与其峰面积线性关系良好(r均不低于0.999 8);检测限分别为0.032 4、0.032 0、0.030 7、0.031 2μg/mL,定量限分别为0.106 8、0.105 6、0.101 2、0.103 0μg/mL;精密度、重复性、稳定性(24 h)试验的RSD均小于1.00%(n=6);平均加样回收率为100.15%～102.95%,RSD均小于2.00%(n=9)。含量测定结果显示,不同产地蚕蛹中尿嘧啶、鸟嘌呤、黄嘌呤、尿苷的含量分别为0.41%～2.46%、0.37%～1.98%、0.72%～2.63%、0.94%～3.67%。结论:所建蚕蛹HPLC指纹图谱及其4个核苷类成分含量测定方法的专属性较强,且准确、可靠,可用于蚕蛹的质量评价及质量控制。