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摘要
目的 分析脑利钠肽对苯肾上腺素(PE)诱导的乳鼠心肌细胞肥大的抑制作用，并基于过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)和脂肪酸氧化探讨其可能作用机制。方法 (1)取新生昆明小鼠的左心室组织，制备心肌细胞。(2)将心肌细胞分为对照组、PE组、10 nmol/L脑利钠肽+PE组、100 nmol/L脑利钠肽+PE组和1 000 nmol/L脑利钠肽+PE组。除对照组外，其余组心肌细胞均给予100μmol/L PE溶液处理，10 nmol/L脑利钠肽+PE组、100 nmol/L脑利钠肽+PE组和1 000 nmol/L脑利钠肽+PE组细胞在PE处理前先分别加入相应浓度脑利钠肽溶液。对照组心肌细胞正常培养，不加任何药物。(3)将心肌细胞随机分为正常组、PE组、PE+抑制剂组和PE+脑利钠肽+抑制剂组。除正常组外，其余组心肌细胞给予100μmol/L PE溶液处理，PE+抑制剂组心肌细胞在PE处理前先加入1μmol/L GSK0660(PPARδ抑制剂)溶液处理，PE+脑利钠肽+抑制剂组心肌细胞在PE处理前同时加入1μmol/L GSK0660溶液和100 nmol/L脑利钠肽溶液处理。(4)干预48 h后，采用免疫荧光技术检测各组心肌细胞表面积；采用实时荧光定量PCR检测各组心肌细胞的心房钠尿肽(ANP)和β-肌球蛋白重链(β-MHC) mRNA表达水平；采用ELISA测定PPARδ抑制剂实验中各组心肌细胞的游离脂肪酸(FFA)含量；采用Western blot检测PPARδ抑制剂实验中各组心肌细胞的PPARδ、肉毒碱棕榈酰基转移酶1(CPT-1)和长链酰基辅酶A脱氢酶(LCAD)的蛋白表达水平。结果 (1)与对照组比较，PE组心肌细胞ANP和β-MHC mRNA表达水平升高，心肌细胞表面积增大(均P<0.05);与PE组比较，各脑利钠肽干预组心肌细胞ANP和β-MHC mRNA表达水平降低，心肌细胞表面积减小(均P<0.05);与10 nmol/L脑利钠肽+PE组比较，100 nmol/L脑利钠肽+PE组、1 000 nmol/L脑利钠肽+PE组心肌细胞ANP和β-MHC mRNA表达水平降低，心肌细胞表面积减小(均P<0.05);与100 nmol/L脑利钠肽+PE组比较，1 000 nmol/L脑利钠肽+PE组心肌细胞ANP和β-MHC mRNA表达水平降低(均P<0.05),而心肌细胞表面积差异无统计学意义(均P>0.05)。(2)PE+抑制剂组、PE+脑利钠肽+抑制剂组、PE组、正常组心肌细胞表面积依次减少(均P<0.05);PE+抑制剂组、PE组、PE+脑利钠肽+抑制剂组、正常组心肌细胞ANP和β-MHC mRNA表达水平、FFA含量依次降低，且PPARδ、CPT-1和LCAD蛋白表达水平依次升高(均P<0.05)。结论 脑利钠肽可抑制PE诱导的乳鼠心肌细胞肥大，其可能是通过上调PPARδ表达、促进脂肪酸氧化而发挥作用。
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单位宁德师范学院
