猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作者：李建达; 于江; 张玉玉; 任素芳; 陈蕾; 郭立辉; 孙文博; 陈智; 王淞; 刘俊珍; 杜以军; 李俊; 杨灵芝; 王金宝; 吴家强

来源：中国畜牧兽医, 2016, 43(12): 3107-3113.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.12.004

• 猪链球菌2型
• 实时荧光定量PCR
• 敏感性
• 特异性
• 重复性

试验根据猪链球菌2型荚膜多糖(CPS)抗原设计CPS2J基因特异性引物,建立猪链球菌2型实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法的标准曲线为y=-3.073x+36.87,r=0.995,熔解曲线只有单一的特异峰。敏感性试验显示,该方法可以检测出模板最低浓度为1.0×101拷贝/μL,是普通PCR的10倍;特异性试验显示,对猪链球菌2型具有良好的特异性,能够区分其他血清型猪链球菌和其他细菌;重复性试验变异系数为0.37%0.63%,均低于2.5%。临床检测显示该方法的敏感性明显高于常规PCR方法和细菌分离的方法。以上结果表明,本研究建立的方法敏感性高、特异性强、重复性好,有利于对猪链球菌2型的快速检测。

• 单位
  动物科技学院; 青岛农业大学; 山东省农业科学院