黄曲霉毒素抗原分子中半抗原偶联比对免疫分析灵敏度的影响

作者：严婷婷; 李培武; 张奇; 陈永勤; 唐晓倩; 张文

来源：中国油料作物学报, 2018, 40(03): 426-431.

• 黄曲霉毒素M1
• 人工抗原
• 抗原鉴定
• 偶联比
• ELISA

为提高黄曲霉毒素的检测灵敏度,探明黄曲霉毒素抗原分子中半抗原偶联比对免疫分析灵敏度的影响。采用黄曲霉毒素M1与羧甲氧基羟氨半盐酸盐进行肟化反应生成半抗原,再经活泼脂法,将半抗原与牛血清白蛋白(BSA)脱水反应实现偶联,生成自制人工抗原AFM1-BSA。采用竞争ELISA法、荧光与紫外光谱法鉴定,结果均证明自制人工抗原AFM1-BSA合成成功。进一步通过摩尔消光系数测算得AFM1的自制和商业抗原偶联比分别为0.7和6.3,自制抗原偶联比仅是商业抗原的1/9,二者偶联方法相同,但偶联比差异显著,为进一步研究比较提供了可能。将自制人工抗原AFM1-BSA和商业抗原AFM1-BSA分别与实验室自制的系列黄曲霉毒素单抗1C11、2C9、LM13、LM47反应,结果显示四种抗体对商业抗原均有很高的灵敏度,只有2C9对自制人工抗原有较高的灵敏度(1.997ng/m L),明显低于商业抗原作为包被抗原与2C9反应时的灵敏度(0.047ng/m L),说明针对同一种毒素AFM1制备的抗体,高偶联比抗原有助于提高免疫分析灵敏度。研究结果为AFM1高灵敏免疫检测技术研究提供了科学依据。

• 单位
  农业部; 生命科学学院; 湖北大学; 中国农业科学院油料作物研究所