硼替佐米靶向NF-κB信号通路抑制结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤的研究

作者：李建华; 张丽; 冯攸; 邹立群^*

来源：四川大学学报（医学版）, 2019, 50(03): 311-316.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2019.03.004

• 结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL)
• 硼替佐米
• 凋亡
• NF-κB信号通路
• BAY11-7082

目的研究硼替佐米对结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL)的抗肿瘤作用。方法单独使用不同质量浓度(0、1、2、4、5、6 ng/mL)硼替佐米处理SNK-6细胞24、48、72 h,及不同浓度核因子-κB (NF-κB)信号通路抑制剂BAY11-7082(0、1、2.5、5、10、20μmol/L)处理SNK-6细胞24 h后,采用CCK8法检测细胞存活率并计算其半数抑制浓度(IC_(50))。联合使用30μmol/L Z-VAD-FMK(Pan-caspase抑制剂)+3 ng/mL硼替佐米,以及5、10μmol/L BAY11-7082+3 ng/mL硼替佐米处理SNK-6细胞24 h,CCK8法检测细胞存活率。不同质量浓度硼替佐米处理SNK-6细胞24 h后,采用AnnexinⅤ/PI流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-3、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)和Bcl-2的表达,检测NF-κB信号通路相关蛋白P65和P100/P52的表达。结果硼替佐米可呈剂量依赖性的抑制SNK-6细胞增殖(P<0.05),24 h IC_(50)[(2.87±0.06) ng/mL]低于48 h和72 h(P<0.05)。BAY11-7082亦可抑制SNK-6细胞增殖,24 h IC_(50)为(9.73±0.36)μmol/L。联合用药结果表明,Z-VAD-FMK能减弱硼替佐米对SNK-6细胞增殖的抑制作用(P<0.05),BAY11-7082能增强硼替佐米对SNK-6细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。硼替佐米处理SNK-6细胞24 h后,凋亡相关蛋白Caspase-3裂解、PARP激活,以及Bcl-2裂解;NF-κB信号通路相关蛋白P65磷酸化水平降低,P52减少。结论硼替佐米通过阻断NF-κB信号通路抑制ENKTL细胞增殖,并且经线粒体介导的Caspase途径诱导ENKTL细胞凋亡。

• 单位
  中国医学科学院北京协和医学院; 四川大学华西第四医院; 四川大学华西医院