抗心磷脂抗体阳性复发性流产小鼠胎盘的差异蛋白组学研究

作者：谢雅贞; 陆启滨^*

来源：生殖医学杂志, 2021, 30(02): 209-216.

• 抗心磷脂抗体阳性流产
• 非标记定量蛋白组学
• 胎盘
• 生物信息学

目的探讨抗心磷脂抗体(ACA)阳性复发性流产小鼠胎盘组织中蛋白的表达谱特征并进行生物信息学分析。方法将20只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组和ACA阳性流产模型组,每组10只。模型组于第1天和第8天通过腹腔注射β2-糖蛋白I(β2-GPI)建立ACA阳性流产模型,正常对照组于相同时间注射等体积生理盐水,腹腔注射后第18天,雌雄1∶1合笼,观察并记录妊娠时间。妊娠第15天处死小鼠,测量胎鼠、胎盘重量,计算胚胎丢失率,ELISA法检测血清、胎盘中ACA含量。采用Label-free蛋白质组学方法筛选两组小鼠胎盘组织中的差异蛋白,并进行GO富集、KEGG通路以及蛋白相互作网络分析,选择差异蛋白中的低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Toll样受体4(TLR-4)、凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)以及维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)进行Western blot验证。结果与正常对照组相比,ACA阳性流产模型组胎鼠及胎盘重量显著下降(P<0.05),胚胎丢失率显著上升(P<0.05),血清、胎盘中ACA含量显著升高(P<0.05)。与正常对照组相比,ACA阳性流产小鼠胎盘组织中鉴别出87个差异表达蛋白,其中35个表达上调,52个表达下调;GO富集分析结果显示差异蛋白主要定位于细胞外,参与跨膜转运活性的调控;KEGG通路分析结果表明差异蛋白主要富集在代谢和磷脂酶D信号通路;蛋白相互作用分析发现差异蛋白中39个蛋白存在相互作用。Western blot验证结果显示,HIF-1α、TLR-4、TSP-1、Tim-3和RORγt表达量在模型组均显著上升(P<0.05),与蛋白组学结果一致。结论成功建立ACA阳性流产小鼠模型。ACA阳性流产小鼠胎盘组织中蛋白表达谱发生显著改变,差异蛋白主要与跨膜转运和代谢通路有关,这些蛋白的差异表达可能与ACA阳性流产有关。

• 单位
  江苏省中医院; 南京中医药大学