摘要
目的研究黄芩素促进骨髓间充质干细胞归巢参与溃疡性结肠炎肠黏膜屏障重建的功能。方法提取大鼠骨髓间充质干细胞,传代培养3代后,利用流式细胞术检测细胞表面CD59、CD45表达情况。鉴定后的细胞被随机分为空白组及黄芩素处理组,后者利用100 ng/ml黄芩素对细胞培养24 h。诱导溃疡性结肠炎大鼠模型,造模成功后分别分为模型组(10只)、MSCs组(10只)及黄芩素干预MSCs组(10只),另取10只大鼠作为空白组。空白组和模型组尾静脉注射1 ml无菌PBS;MSCs组尾静脉注射2×106个骨髓间充质干细胞;黄芩素干预MSCs组尾静脉注射2×106个黄芩素共培养后的骨髓间充质干细胞悬液。尾静脉回输后第5、10天,分别处死5只大鼠,采集结肠标本并制作冰冻切片。利用免疫组化法检测肠干细胞标记物Musashi-1的表达情况;Western blot法检测Lgr5和Ephrin-B3蛋白在各组大鼠结肠中的表达水平变化。结果细胞传代培养后呈现贴壁生长。流式细胞术结果显示,传代3代后的细胞为CD90+/CD45-,属于骨髓间充质干细胞。免疫组化结果显示,尾静脉注射后第5天,各组Musashi-1积分值差异无统计学意义。给药后第10天,黄芩素干预MSCs组的Musashi-1积分值升高,且高于第10天MSCs组的积分值。Western blot结果表明,黄芩素干预MSCs组结肠组织的Lgr5和Ephrin-B3表达量高于空白组、模型组及MSCs组。结论黄芩素可促进骨髓间充质干细胞归巢参与溃疡性结肠炎肠黏膜屏障功能的重建,对溃疡性结肠炎具有治疗效果。
-
单位武汉生物工程学院; 郧西县人民医院