鸡传染性法氏囊病超强毒VP1基因的原核表达及兔抗血清的制备

作者：康忠惠; 王永强; 王琦; 李久宽; 秦立廷; 高玉龙; 高宏雷; 祁小乐; 林欢; 王笑梅; 许修宏

来源：中国家禽, 2011, (02): 11-14.

DOI：10.16372/j.issn.1004-6364.2011.02.007

• 鸡传染性法氏囊病超强毒
• VP1
• 原核表达
• 兔抗VP1血清 very virulent infectious bursal disease virus
• prokaryotic expression
• rabbit antiserum against VP1

以鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增VP1基因,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切处理后与经相同酶切处理的pET-30a原核表达载体连接,将酶切、PCR及测序鉴定正确的阳性重组子转化BL21(DE3)感受态细胞,融合蛋白His-VP1经IPTG诱导表达后主要以包涵体形式存在。Western blot检测到约97ku的目的蛋白能够与特异性的VP1单克隆抗体反应。将纯化的目的蛋白免疫新西兰白兔后获得了抗VP1蛋白的血清。该血清能够与重组杆状病毒rBacGxVP1感染的sf9细胞发生特异性反应,而且其ELISA抗体效价达到1∶25600。鸡传染性法氏囊病超强毒VP1基因的...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室; 东北农业大学