摘要
目的研究一种新的来源于节律蛋白mCLOCK's DNA结合域的穿膜肽mCLOCK's DNA-BIND(CDB)作为药物携带载体的生物安全性。方法化学合成穿膜肽CDB。体外采用Phorbol12-Myristate13-acetate(PMA)诱导NIH3T3细胞的近日节律。于诱导后不同时间点,CDB与小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞共孵育,RT-PCR检测其对近日节律核心分子mPeriod1(mPer1)基因表达的影响。此外,培养的NIH3T3直接与CDB共孵育12h和24h后,MTT法检测其对细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对细胞周期和凋亡的作用。结果CDB没有明显影响PMA诱导的mPer1节律基因表达。此外,CDB不干扰NIH3T3细胞增殖及生长周期,亦无明显的诱导凋亡作用。结论CDB对细胞近日节律、细胞增殖、生长周期及细胞凋亡均无明显毒副效应,可望作为一种安全有效药物载体,并具有广泛的临床应用前景。
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单位华西医学中心; 四川省医学科学院; 四川大学; 四川省人民医院