头孢菌素脱乙酰酶的重组表达及固定化

作者：王群; 魏东芝; 沈亚领; 陈鑫; 金雄熊; 叶凤起

来源：工业微生物, 2014, 44(04): 66-69.

• 头孢菌素脱乙酰酶
• 生物催化
• 固定化
• 重组大肠杆菌
• 7-ACA

本文构建了利用trp启动子表达头孢菌素脱乙酰酶(CAH)的重组大肠杆菌DH5α-pCAH。重组菌在7L发酵罐(装液量2L)中发酵28 h,发酵液OD600达到27,产酶313 kU/L发酵液,粗略估算重组蛋白占细胞总蛋白的70%。发酵生产的重组CAH粗酶液经过硫酸铵分级沉淀分离纯化和超滤除盐浓缩两步操作,纯化倍数为1.

• 单位
  华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室