摘要
【目的】探讨p75神经营养因子受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)对口腔鳞状细胞癌细胞迁移、侵袭能力的影响及机制。【方法】以口腔鳞状细胞癌细胞Tca8113为研究对象,流式细胞术筛选p75NTR阳性细胞,细胞转染小干扰RNA阴性对照(siRNA control)和p75NTR小干扰RNA(p75NTR siRNA)分别命名为NC组和干扰组,同时以没有转染的细胞为未转染组,RT-PCR和Western blotting检测转染后细胞中p75NTR mRNA和蛋白水平,细胞划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室检测细胞侵袭,Western blotting检测细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloprotease,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotease 9,MMP-9)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白水平。【结果】未转染组、NC组、干扰组p75NTR mRNA表达水平依次为:(1.02±0.09)、(0.99±0.05)、(0.36±0.06),p75NTR蛋白水平依次为:(0.86±0.06)、(0.86±0.07)、(0.32±0.04)。干扰组p75NTR mRNA和蛋白水平均明显低于未转染组(P<0.05)。未转染组、NC组、干扰组细胞迁移率依次为:(100.01±11.36)%、(100.03±10.94)%、(62.94±5.74)%。干扰组细胞迁移率明显低于未转染组(P<0.05)。未转染组、NC组、干扰组侵袭细胞数目依次为:(115.64±13.05)、(114.87±14.61)、(73.25±9.33)。干扰组侵袭细胞数目明显低于未转染组(P<0.05)。未转染组、NC组、干扰组细胞中MMP-2蛋白水平依次为:(1.25±0.09)、(1.26±0.11)、(0.42±0.03),MMP-9蛋白水平依次为:(0.53±0.04)、(0.52±0.07)、(0.20±0.04),Akt蛋白水平依次为:(1.05±0.06)、(1.02±0.08)、(1.05±0.04),p-Akt蛋白水平依次为:(0.28±0.04)、(0.27±0.06)、(0.02±0.01)。干扰组细胞中MMP-2、MMP-9、p-Akt表达水平均明显低于未转染组(P<0.05)。【结论】干扰p75NTR表达后的口腔鳞状细胞癌细胞侵袭迁移能力下降,其作用机制可能与细胞内MMP-2、MMP-9和Akt信号通路有关。
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单位湘雅二医院; 中南大学