ACAC通过mTOR信号通路抑制自噬诱导奶牛乳腺上皮细胞氧化应激

作者：高爽; 宋倩; 董昊; 孙旭东^*; 徐闯^*

来源：中国兽医学报, 2023, 43(07): 1456-1462.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2023.07.14

• mTOR
• 自噬
• ACAC
• 奶牛乳腺上皮细胞
• 氧化应激

旨在探究乙酰乙酸(acetoacetic acid, ACAC)是否通过抑制mTOR信号通路介导的自噬诱导奶牛乳腺上皮细胞发生氧化应激。用不同浓度的ACAC(0,0.6,1.2或1.8 mmol/L)处理奶牛乳腺上皮细胞系(MAC-T)24 h;用2.5μmol/L的雷帕霉素(rapamycin, RAPA)预处理MAC-T 24 h后加入1.2 mmol/L ACAC处理24 h。使用试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的活性，采用蛋白质免疫印迹法测定mTOR、p-mTOR、LC3-Ⅱ及p62的蛋白表达情况，通过q-PCR对自噬相关因子5(autophagy related 5 homolog, ATG5)和自噬相关因子7(autophagy related 7 homolog, ATG7)的基因表达水平进行定量分析。结果显示，与0 mmol/L ACAC组相比，不同浓度ACAC处理后，ROS的含量呈浓度依赖性升高，SOD的活性逐渐下降，p-mTOR/mTOR蛋白表达量显著升高，而ATG5、ATG7的基因表达水平显著降低。与ACAC+DMSO组相比，ACAC+RAPA组的p-mTOR/mTOR及p62蛋白表达量显著降低，而LC3-Ⅱ蛋白表达量显著升高，ATG5、ATG7的基因表达水平显著升高。此外，与ACAC+DMSO组相比，ACAC+RAPA组的ROS含量显著降低，SOD活性显著升高。结果表明，ACAC通过抑制mTOR信号通路介导的自噬诱导了奶牛乳腺上皮细胞氧化应激。因此，mTOR介导的自噬可能是缓解代谢应激导致奶牛乳腺上皮细胞氧化应激的防治靶点。

• 单位
  动物科技学院; 黑龙江八一农垦大学