小分子酪氨酸激酶抑制剂A2B通过调控PI3K/Akt通路诱导胃癌细胞凋亡

作者：敖嘉怡; 叶连宝; 马宇昕; 褚夫江; 周畅

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(10): 1806-1813.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2023.10.010

• 酪氨酸激酶抑制剂
• 胃癌
• 表皮生长因子受体
• 人表皮生长因子受体2
• 细胞间充质-表皮转化因子

目的：探讨小分子酪氨酸激酶抑制剂A2B诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的分子机制。方法：体外培养人胃癌SGC-7901细胞并加入2.5～160μmol/L梯度浓度的A2B分别干预24、48和72 h，利用CCK-8法检测细胞活力的半数抑制浓度（IC50），筛选出药物最适浓度。后续实验将SGC-7901细胞随机分为对照组（正常培养组）、溶剂组（含0.08%DMSO培养液处理）、A2B 10μmol/L实验组和A2B 20μmol/L实验组，每组每项实验均重复3次。利用EdU细胞染色实验和平板集落形成实验检测各组细胞增殖能力；Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡率；线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1染色法）检测各组细胞线粒体膜电位变化；Western blot检测各组细胞中表皮生长因子受体（EGFR）、人表皮生长因子受体2(HER2)、细胞间充质-表皮转化因子（c-Met）、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、caspase-3、cleaved caspase-3、蛋白激酶B(PKB/Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白的表达情况。结果：（1）A2B作用于人胃癌SGC-7901细胞24、48和72 h的IC50值分别为26.85、19.58和12.24μmol/L;(2)20μmol/L A2B能够同时下调EGFR、HER2和c-Met蛋白水平（P<0.01）;(3)10和20μmol/L A2B作用于SGC-7901细胞后，EdU+细胞数和集落数均显著减少（P<0.01）;(4)经A2B处理后SGC-7901细胞凋亡率增加（P<0.05）,JC-1绿色荧光比例增加（P<0.01），同时Bax/Bcl-2比值和cleaved caspase-3蛋白表达水平上调（P<0.05）,caspase-3蛋白表达水平下调（P<0.05）;(5)A2B还下调了SGC-7901细胞中p-Akt/Akt比值（P<0.05）。结论：A2B能够靶向作用于EGFR、HER2和c-Met，并通过抑制PI3K/Akt信号通路激活，诱导人胃癌SGC-7901细胞发生凋亡。

• 单位
  基础医学院; 广东药科大学