高原鼠兔HIF-1α基因真核表达载体的构建及细胞表达和定位

作者：李红阁; 赵新全; 常智杰; 任永明; 王德鹏

来源：安徽农业科学, 2009, (10): 4386-4388+4393.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.10.028

• 高原鼠兔
• HIF-1α基因
• 真核表达载体 Plateau pika
• HIF-1α gene
• Eukaryotic expression vector

利用PCR从克隆质粒PMD18-T-pHIF-1α中扩增鼠兔HIF-1α;构建重组质粒pcDNA3.0/6Xmyc-p HIF-1α,用重组质粒转染HEK-293T,HeLa和COS-7细胞,通过免疫印迹分析,检测HIF-1α表达蛋白在细胞中的分布。EcoRI和XhoⅠ酶切鉴定和序列分析表明,构建的pcDNA3.0/6Xmyc-pHIF-1α真核表达载体序列正确;HIF-1α在真核细胞中能够正确表达,且其表达产物主要存在于细胞核中。

• 单位
  清华大学; 膜生物学国家重点实验室; 中国科学院研究生院; 中国科学院西北高原生物研究所