H5、H7和H9亚型禽流感病毒多重反转录聚合酶链式反应检测方法的建立

作者：张文慧; 王伟利; 郑聪; 刘明; 钱爱东

来源：中国兽医学报, 2010, (03): 359-361.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2010.03.029

• 多重反转录聚合酶链式反应
• 禽流感病毒
• H5亚型
• H7亚型
• H9亚型 multiplex RT-PCR
• avian influenza virus
• H5 subtype
• H7 subtype
• H9 subtype

参考GenBank登录的H5、H7和H9亚型禽流感病毒(AIV)的血凝素基因序列,利用DNAStar软件分析其同源性,利用Primer Premier5.0软件设计3对分别针对AIVH5、H7和H9亚型的特异性引物。3对引物所扩增的cDNA片段大小分别为427、228、830bp。结果显示,利用3对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,建立了同时检测H5、H7和H9亚型AIV的多重RT-PCR技术。该方法对H5、H7和H9亚型AIV能同时扩增出3条大小分别为427、228、830bp的cDNA片段,与其他常见禽病病原不存在交叉反应。该方法对H5、H7和H9亚型AIVcDNA的最低检出量分...

• 单位
  中国农业科学院; 吉林出入境检验检疫局; 吉林农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室