摘要

目的:探究富血小板血浆(PRP)和弗林蛋白酶(Furin)激动剂对SD大鼠膝骨关节炎(KOA)的影响。方法:(1)体内实验部分,通过手术离断SD大鼠前交叉韧带建立KOA模型;实验组(10只)关节腔隔天注射0.5 ml激活后的PRP,对照组(模型组,10只)和假手术组(10只)关节腔隔天注射0.9%氯化钠溶液0.5 ml,持续4周;取大鼠膝关节组织采用HE、甲苯胺蓝和番红固绿染色显示病理损伤,采用免疫组化染色检测软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS)-5和白细胞介素(IL)-1β两种相关抗体的表达。(2)体外实验部分,采用脂多糖(LPS)诱导关节软骨细胞炎症模型,用递增浓度PRP和Furin激动剂干预LPS处理的SD大鼠软骨细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测相关基因[基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、IL-6、ADAMTS-4、ADAMTS-5、IL-1β和环氧化酶(COX)-2、聚蛋白多糖(ACAN)和Ⅱ型胶原A1(COL2A1)]mRNA的表达,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平。结果:(1)体内实验部分,膝关节大体观及病理切片染色结果均显示,与对照组相比,实验组关节软骨病理损伤程度明显减轻。(2)体外实验部分,ELISA结果显示,加入LPS后IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS浓度显著增加,加入不同浓度PRP后各炎症因子浓度随着PRP浓度的增加呈下降趋势,加入Furin激动剂后各炎症因子浓度亦有所下降(均P<0.05);RT-PCR结果显示,加入LPS后MMP-3、MMP-13、IL-6、ADAMTS-4、ADAMTS-5、IL-1β和COX-2的mRNA表达增加,ACAN和COL2A1的mRNA表达下降(均P<0.05),而加入不同浓度PRP和Furin激动剂后上述指标有所修复。结论:PRP和Furin激动剂对SD大鼠KOA均有明显的缓解作用。