地骨皮的多重位点特异性PCR鉴别

作者：石旸; 胡力; 赵玉洋; 蒋超; 金艳; 穆婧^*; 袁媛^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 1-8.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230816

• 地骨皮
• 枸杞
• 宁夏枸杞
• 分子鉴定
• 聚合酶链式反应

目的：使用多重位点特异性聚合酶链式反应（PCR）的方法，简单高效地鉴定地骨皮（Lycii Cortex）的两种基原枸杞（Lycium chinense ）和宁夏枸杞（Lycium barbarum）。方法：在使用植物叶绿体基因组数据库（CGIR）获取枸杞和宁夏枸杞叶绿体基因组序列的基础上，利用IdenDSS软件筛选出两基原间特定的单核苷酸多态性（SNP）位点，并利用Primer 5.0软件设计获得特异性鉴别引物，包括鉴别枸杞的引物GQ-F/R、鉴别宁夏枸杞的引物NX-F/R。对引物浓度比、退火温度、循环次数、Taq酶进行优化，形成最适的PCR鉴别体系和条件，并对采集自不同地区的地骨皮进行适用性考察。结果：对影响PCR结果的各个条件进行考察优化后，最终确定枸杞和宁夏枸杞的引物浓度比为2:1、退火温度为59 ℃、循环次数为30次时，来自不同产区地骨皮的两个基原枸杞和宁夏枸杞分别在183、295 bp的位置出现特异性鉴别条带。结论：通过一次PCR即可方便、快捷、高效地鉴定地骨皮的基原，为枸杞和宁夏枸杞的专属性鉴别提供新方法，同时对含有地骨皮成分的经典名方的研发提供一定的技术支撑。

• 单位
  中国中医科学院