体外实时动态监测水动力注射分泌型荧光素酶基因的表达

作者：田文洪; 王刚; 罗顺涛; 董小岩; 付昕阳; 谭文杰; 吴小兵

来源：生物工程学报, 2009, (10): 1552-1557.

DOI：10.13345/j.cjb.2009.10.006

• 水动力注射
• 基因表达
• Gluc
• 监测
• ex vivo hydrodynamic injection
• gene expression
• Gluc
• monitoring
• ex vivo

为了建立体外实时动态监测转导基因的体内表达,本研究选择分泌型的荧光素酶基因Gluc作为报告基因,对其体内外表达特性和检测方法进行了研究。首先构建了Gluc表达质粒pAAV2neo-Gluc。将pAAV2neo-Gluc转染体外培养的Huh7、HepG2细胞后,细胞培养上清和细胞裂解液中分别检测到Gluc的活性,而上清比细胞中的含量高约100倍。表明表达的Gluc以分泌形式为主。用水动力法经小鼠尾静脉注射pAAV2neo-Gluc质粒,活体成像表明Gluc在小鼠体内呈全身分布,而注射了萤火虫荧光素酶质粒pAAV2neo-Fluc的对照小鼠则主要在肝脏显像。将剂量分别为0.1、1、10、50μg每...

• 单位
  四川大学; 生物治疗国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所