山地乌骨鸡β防御素Gal-2基因的克隆及酵母表达载体的构建

作者：刘海燕; 岳华; 汤承; 杨发龙; 张焕容; 黄兴; 张平; 周光荣

来源：黑龙江畜牧兽医, 2011, (19): 16-19+23.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2011.19.016

• 山地乌骨鸡
• β防御素
• Gal-2基因
• 克隆
• 酵母
• 表达
• 载体 Mountain dark-bone chickens
• β defensin
• Gal-2 gene
• clone
• yeast expression
• vector

为了构建山地乌骨鸡β防御素Gal-2基因酵母表达载体,试验根据GenBank中鸡β防御素Gal-2基因序列设计引物,采用RT-PCR技术从山地乌骨鸡骨髓细胞中扩增出Gal-2基因,经PCR和酶切鉴定后测序,并采用DNAStar软件进行生物信息学分析;再根据毕赤酵母偏爱密码子和山地乌骨鸡β-防御素Gal-2成熟肽编码基因序列设计并合成1对引物,采用PCR技术从重组质粒pMD18-T-Gal-2扩增出其成熟肽编码基因,并将其插入载体pPICZaA,构建重组质粒pPICZaA-Gal-2,将pPICZaA-Gal-2线性化,通过电击转入毕赤酵母菌株GS115,用1%甲醇诱导表达120 h,表达产物纯...

• 单位
  成都农业科技职业学院; 西南民族大学