熊果酸对HepG2细胞中有机阴离子转运多肽1B3表达的影响及其机制研究

作者：丁薇; 朱丹丹; 刘名义; 张艳丽; 许玉; 叶容芳; 熊玉卿^*

来源：中国临床药理学杂志, 2019, 35(19): 2351-2355.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2019.19.043

• 熊果酸
• 有机阴离子转运多肽1B3
• 法尼酯X受体

目的研究熊果酸(UA)对有机阴离子转运多肽1B3功能和表达的影响及其机制。方法实验分为实验组、空白组和对照组,实验组为用不同浓度的UA作用于Hep G2细胞24 h,空白组和对照组分别给予0.1%二甲基亚砜(DMSO)和FXR激动剂GW4064。用LC-MS/MS法检测Hep G2细胞中替米沙坦的含量;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测OATP1B3和FXR mRNA水平;用Western blotting测定OATP1B3和FXR的蛋白表达水平;用双荧光素酶报告基因法研究熊果酸对FXR转录调控OATP1B3表达的影响机制。结果与空白组比较,4,8,16,32μmol·L-1的UA增加Hep G2细胞中替米沙坦的摄取量,分别上调了77.8%,103.9%,114.6%,131.3%;UA也能明显上调OATP1B3mRNA和蛋白的表达水平,OATP1B3 mRNA表达分别上调了89.0%,90.0%,112.7%及126.3%,OATP1B3蛋白分别上调了42.0%,46.0%,64.3%及72.3%;与空白组比较,实验组FXR mRNA的表达分别上调了64.7%,65.0%,69.7%及110.0%,FXR蛋白的表达分别上调了38.3%,42.7%,53.0%及72.7%,对照组FXR mRNA和蛋白分别上调了191.0%和107.0%;与正常组相比,UA(8,16和32μmol·L-1)对沉默了FXR的Hep G2细胞的OATP1B3蛋白、mRNA和转运功能的上调作用都显著减少;双荧光素酶报告基因结果显示:4,8,16,32μmol·L-1熊果酸分别能使报告基因p GL3-OATP1B3荧光素酶活性上调66.0%,81.0%,124.3%及143.7%,FXR激动剂10μmol·L-1GW4064能使报告基因OATP1B3荧光素酶活性上调228.0%。结论熊果酸可以诱导OATP1B3 mRNA和蛋白的表达,这种作用可能是通过核受体FXR调控的。

• 单位
  南昌大学