伴PTEN突变前列腺癌细胞株PC-3细胞增殖机制的研究

作者：徐凝馨; 曹琼; 李小文; 李文龙; 孙心旖; 林晓雨; 刘铭; 覃艳红; 李莉^*

来源：毒理学杂志, 2020, 34(04): 285-290.

DOI：10.16421/j.cnki.1002-3127.2020.04.003

• 蛋白激酶抑制剂
• PC-3细胞
• PI3K/AKT信号通路

目的通过蛋白激酶抑制剂敏感性分析揭示伴PTEN突变前列腺癌细胞株PC-3细胞增殖的分子机制。方法选择9种关键激酶抑制剂作用于PC-3细胞,CCK8法检测蛋白激酶抑制剂对PC-3细胞增殖的影响;PTEN基因经RT-PCR扩增后测序检测PC-3细胞中PTEN的突变;Western blot分析PI3K和mTOR抑制剂对PC-3细胞信号通路中关键激酶表达水平的影响;细胞经蛋白激酶抑制剂处理后,采用Annexin V-FITC和溴化丙啶染色,荧光显微镜观察PC-3细胞的凋亡情况。结果 GSK2126458、AZD6482、Rapamycin和OSI-027可明显抑制PC-3细胞增殖,且AZD6482和Rapamycin对PC-3细胞增殖具有协同抑制作用;测序结果显示PC-3细胞存在PTEN第78位氨基酸错义突变;Western blot结果表明,与对照组和AZD6482单药组相比,Rapamycin单药以及AZD6482联合Rapamycin作用于PC-3细胞后AKT蛋白磷酸化水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。药物作用于细胞48和72 h后,AZD6482单药组、Rapamycin单药组和AZD6482+Rapamycin联合组的细胞凋亡比例较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PI3K/AKT信号通路在伴PTEN突变的PC-3细胞增殖和凋亡过程中起关键作用,从而参与前列腺癌的发展过程。

• 单位
  基础医学院; 第二临床医学院; 山西医科大学