大鼠锌指蛋白ZFP580的原核表达与分离纯化

作者：牟心红; 李海生; 梁林; 张文成

来源：武警后勤学院学报(医学版), 2012, (06): 405-407.

• 锌指蛋白580
• 原核表达
• SDS聚丙烯酰氨凝胶电泳 Zinc finger protein 580
• Prokaryotic expression
• Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis

【目的】构建ZFP580基因的原核表达质粒,转化大肠杆菌,诱导表达并分离纯化大鼠锌指蛋白ZFP580。【方法】根据ZFP580 cDNA序列的开放阅读框设计引物,利用PCR技术扩增ZFP580的开放阅读框cDNA序列,将PCR扩增的目的片段与载体pET30a分别双酶切、回收纯化后做定向连接,Nco I、Xho I双酶切电泳筛选、鉴定并测序。将构建的重组质粒pET30a-ZFP580转化大肠杆菌BL21(DE3),由异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化目的蛋白。【结果】成功扩增ZFP580基因并构建了表达质粒pET30a-ZFP580,测序结果表明与GeneBank公布的序列一致。...

• 单位
  中国人民武装警察部队后勤学院