微小RNA-296-3p靶向核蛋白1调控舌鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

作者：孙晓辉^*; 宋杰

来源：中国医师进修杂志, 2021, 44(10).

• 舌肿瘤
• 微小RNA-296-3p
• 核蛋白1
• 细胞增殖
• 细胞运动
• 肿瘤侵润

目的研究微小RNA-296-3p对舌鳞状细胞癌(简称舌鳞癌)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在机制。方法以正常口腔上皮黏膜角质细胞HOK为对照, 实时定量聚合酶链反应法检测舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p和核蛋白1(NUPR1) mRNA的表达, 蛋白印迹法检测NUPR1蛋白表达水平。CAL27细胞分为对照组(NC组)、miR-con组、miR-296-3p组、si-con组、si-NUPR1组、miR-296-3p+pcDNA组和miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组, 细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测细胞活性, Transwell检测细胞迁移和侵袭, 蛋白印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证CAL27细胞中miR-296-3p与NUPR1的调控关系。结果与HOK细胞相比, 在舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p的含量显著降低(0.54 ± 0.08、0.38 ± 0.05、0.59 ± 0.07比1.04 ± 0.12, t = 10.401、15.231、9.718, P均<0.05), NUPR1 mRNA (5.94 ± 0.40、4.48 ± 0.45、5.19 ± 0.48比0.94 ± 0.12, t = 35.918、22.803、25.769)和NUPR1蛋白(0.79 ± 0.09、0.54 ± 0.05、0.62 ± 0.08比0.28 ± 0.04, t = 15.535、12.182、11.404)表达量均显著升高(P均<0.05)。与NC组、miR-con组相比, miR-296-3p组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低(P均<0.05)。与NC组、si-con组相比, si-NUPR1组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低(P均<0.05)。miR-296-3p在CAL27细胞负调控NUPR1表达。与miR-296-3p+pcDNA组相比, miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组CAL27细胞活性(138.34 ± 5.73比98.54 ± 5.89, t = 14.530)、迁移数(95.28 ± 7.56比67.92 ± 5.23, t = 8.929)、侵袭数(184.53 ± 17.57比101.26 ± 10.64, t = 12.162)及PCNA (0.68 ± 0.07比0.35 ± 0.06, t = 10.738)、MMP-2(0.43 ± 0.05比0.29 ± 0.04, t = 6.559)和MMP-9(0.58 ± 0.06比0.33 ± 0.08, t = 7.500)的蛋白表达均升高(P均<0.05)。结论 miR-296-3p通过靶向负调控NUPR1表达抑制舌鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

• 单位
  聊城市第四人民医院; 聊城市第三人民医院