HEK 293细胞中重组型抗体表达和分泌的监测系统的构建

作者：何曾安; 柳艺石; 张慧杰; 高晓冬; 藤田盛久^*

来源：食品与生物技术学报, 2019, 38(07): 1-8.

• 抗体
• 流式细胞术
• 蛋白质分泌
• EGFP

免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)作为一种十分重要的生物药物,已被广泛应用于多种医学诊断和治疗。为构建高效表达重组抗体的哺乳动物生产菌株,运用可以灵活检测抗体分泌运输的表达细胞株,从而充分理解抗体的折叠、转运及分泌尤为重要。作者在哺乳动物细胞株(HEK 293)中构建了一个稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)融合型抗体E-F-HyHEL10的表达系统,可通过流式细胞术检测抗体的分泌运输。此哺乳动物细胞表达系统具有良好的抗体表达和分泌水平,且稳定维持了抗体的功能活性。使用布雷菲德菌素A(brefeldin A)和放线菌酮处理细胞后,来自胞内E-F-HyHEL10的GFP荧光信号与抗体分泌水平呈正相关。结果表明,本研究中构建的抗体表达系统可实现抗体表达、累积和分泌水平的灵活准确监测,未来可应用于哺乳动物细胞中抗体分泌相关因子的筛选。

• 单位
  江南大学; 生物工程学院