水蛭素对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响

作者:李芬芬; 尹忠诚; 张颖*
来源:中国现代应用药学, 2020, 37(24): 2945-2952.
DOI:10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2020.24.001

摘要

目的探讨水蛭素对高磷诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化的影响及机制。方法采用β-甘油磷酸诱导体外培养的大鼠VSMCs,建立钙化模型,加入不同浓度水蛭素进行干预,实验设置5个组:对照组、钙化组、低浓度水蛭素组、中浓度水蛭素组、高浓度水蛭素组。通过茜素红S染色及细胞内钙含量检测各组细胞钙化情况;用qRT-PCR及Western blotting检测各组细胞α-SMA、RUNX2、BMP2的mRNA和蛋白表达量及细胞内碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性以测定各组细胞转分化情况。结果与对照组比较,高磷诱导的钙化组中茜素红S染色可见明显橘红色钙化结节,钙含量检测显示细胞内钙含量明显增加(P<0.01),细胞内ALP活性升高(P<0.01),α-SMA的mRNA及蛋白表达量降低(P<0.01),RUNX2、BMP2的mRNA及蛋白表达量升高(P<0.01)。与钙化组比较,水蛭素组茜素红S染色结果显示的橘红色钙化结节呈浓度依赖性减少,细胞内钙含量及ALP活性呈浓度依赖性降低(P<0.05或P<0.01),α-SMA的mRNA及蛋白表达量呈浓度依赖性升高(P<0.05或P<0.01),RUNX2、BMP2的mRNA及蛋白表达量呈浓度依赖性降低(P<0.05或P<0.01)。结论水蛭素通过抑制高磷诱导大鼠VSMCs转分化来减轻VSMCs的钙化,其机制可能与上调α-SMA的表达,下调ALP活性、RUNX2及BMP2的表达有关。