利用分泌型荧光素酶体外长期监测小鼠肝脏microRNA活性

作者：王刚; 董小岩; 胡键阳; 田文洪; 尉迟捷; 王岳; 吴小兵

来源：中国科学:生命科学 , 2011, (04): 273-280.

• microRNA传感器
• 分泌型Gaussia荧光素酶
• 体外监测

活体动物microRNA(miRNA)检测技术对阐明miRNA的生物学功能非常重要.但是,目前缺乏一种方便灵敏的实时反映活体动物miRNA活性及其变化的体外监测手段.通过在分泌型荧光素酶Gluc(Gaussia princeps luciferase)mRNA的3′非翻译区插入相应miRNA的靶序列构建一系列miRNA传感器.将miRNA传感器体外转染培养细胞和通过水动力注射方法转染小鼠肝脏,通过检测细胞培养上清和外周血液中的Gluc来反映细胞内和活体动物肝脏的miRNA活性.结果显示,CMV启动子驱动的miRNA传感器可以长期监测体外培养细胞中的miRNA和短期监测小鼠肝脏的miRNA,但由...

• 单位
  复旦大学; 宁夏医科大学; 生命科学学院; 遗传工程国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所