人源性抗核抗体Fab片段噬菌体抗体库的构建

作者：钱新宇; 陆慧琦; 李爱民; 罗荣城; 韩焕兴

来源：解放军医学杂志, 2007, (11): 1141-1144.

DOI：10.3321/j.issn:0577-7402.2007.11.014

• 抗体
• 抗核
• 抗体
• 单克隆
• 噬菌体抗体库
• 肿瘤 antibodies
• antinuclear
• antibodies
• monoclonal
• phage antibody library
• neoplasm

目的构建人源性抗核抗体(ANA)Fab片段噬菌体抗体库。方法从4名ANA滴度大于1∶10000的自身免疫病患者外周血淋巴细胞中抽提总RNA,用RT-PCR技术扩增免疫球蛋白分子轻链κ、λ基因及重链Fd基因。将轻链基因片段克隆入pComb3Hss载体以构建轻链文库,随后将重链基因载入κ/λ-pComb3Hss载体,形成κ/λ-Fd-pComb3Hss质粒,然后将重组质粒转化大肠杆菌XL1-Blue。用辅助噬菌体M13KO7感染XL1-Blue,随机的重组抗体文库即表达于丝状噬菌体表面。结果扩增了长度为660bp的轻链κ、λ基因及重链Fd基因,并成功构建了库容为2×104的轻链基因抗体库和库容为4...

• 单位
  长征医院实验诊断科; 南方医科大学南方医院