肝细胞癌人源抗c-Met抗体Fab的筛选及鉴定

作者：孙慧; 万佳艺; 朱晓娟; 焦永军; 朱进; 冯振卿; 刘政

来源：中华肝脏病杂志, 2008, 16(7): 505-508.

DOI：10.3321/j.issn:1007-3418.2008.07.007

• 癌
• 肝细胞
• 受体蛋白质酪氨酸激酶类
• 治疗

目的 从大容量人源Fab抗体库中筛选全人源抗c-Met抗体,并对抗体与肝癌细胞的结合活性进行初步鉴定.方法 利用Met-Fc融合蛋白对大容量人源Fab抗体库进行固相筛选,经过5轮固相筛选,随机挑选30个克隆经酶联免疫吸附法差减鉴定,阳性克隆进行可溶性表达,用c-Met表达阳性的人肝癌细胞株鉴定抗c-Met抗体Fab的结合活性.结果 Western blot、免疫荧光结果显示,c-Met分子表达于SMMC721、BEL7402人肝癌细胞膜上;从大容量人源Fab抗体库中筛选出1株抗c-Met抗体Fab(AM2-26),经免疫共沉淀、荧光激活细胞分类术、免疫荧光分析,结果显示AM2-26与人肝癌细胞表面c-Met分子有较好的结合活性.结论 从人源Fab抗体库中筛选的AM2-26能够与肝癌细胞表面c-Met分子特异性结合,为研制用于肝癌生物治疗的靶向药物,提供了候选分子.

• 单位
  南京医科大学; 南京医科大学第二附属医院; 华东医学生物技术研究所; 江苏省疾病预防控制中心