构建促红细胞生成素表达载体及其在肾小管上皮细胞中的表达

作者：朱蓓; 赵卫红; 吴剑卿

来源：中国血液净化, 2009, 8(04): 211-214.

• 促红细胞生成素
• 近端肾小管上皮细胞
• 基因转染
• 基因表达

目的构建促红细胞生成素(EPO)表达质粒,并在人近端肾小管上皮细胞中稳定表达。方法应用标准分子克隆技术构建EPO真核表达载体pcDNA3.1(-)-hEPO。磷酸钙法转染人肾小管近端上皮细胞(HK-2)。酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养液上清中的EPO含量。MTT法绘制各组细胞生长曲线。结果构建获得EPO基因的表达质粒,并成功转染肾小管上皮细胞,后者经G418筛选,稳定表达EPO。转染后第21天,其表达量为同期转染的293细胞的(35.0±5.3)%。转染后HK-2细胞生长曲线未见明显改变。结论人近端肾小管上皮细胞可以稳定表达EPO,这为EPO基因治疗选择新靶点奠定了基础。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院