CHIP基因及其突变体的克隆及在人卵巢癌细胞SKOV3中的表达

作者：王生余原野侯春梅于晓妉

来源：军事医学科学院院刊, 2005, (04): 316-320.

• 热休克蛋白70羧基端作用蛋白
• 基因表达
• TPR结构域
• U-box结构域
• 突变
• 卵巢肿瘤 carboxyl terminus of Hsc/Hsp70-interacting pro tein
• gene expression
• TPR domain
• U-box domain
• mutation
• ovarian neoplasms

目的:热休克蛋白70羧基端作用蛋白(CHIP)是近年来新发现的同时具有辅助伴侣分子和E3泛素连接酶活性的特殊蛋白分子,但其对相应底物蛋白代谢和活性的调控机制尚不十分清楚。本研究拟构建含CHIP全长编码基因的真核表达载体,并在此基础上构建含CHIP不同功能结构域突变体和缺失体基因的表达载体,以实现这些基因在真核细胞中的高效表达,为后续探讨CHIP相关功能的实验奠定基础。方法:从高表达CHIP的人非小细胞肺癌H322细胞中提取总RNA,以此为模板,采用逆转录巢式PCR(RT-nested-PCR)获得CHIP全长编码基因,经测序确定序列正确后将CHIP基因连入带有myc标签的克隆载体pCMV-Ta...

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所