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摘要
目的:通过小鼠尾静脉注射r AAV8-GFP病毒,观察腺相关病毒作为基因治疗载体在肾组织的表达情况,探讨此造模方法使腺相关病毒作为基因载体在肾脏表达的可行性,为进一步基因治疗肾脏疾病提供依据。方法:取16只C57-BL6小鼠,随机分为两组(n=8),对照组小鼠尾静脉注射PBS 0.2 ml,模型组小鼠尾静脉注射含有1×1011Iu/ml r AAV8-GFP 0.2 ml,4周后处死小鼠,用HE染色和免疫组化方法分别观察携有绿色荧光蛋白(GFP)r AAV-8在肾脏、肝脏、脾脏、肺脏和心脏等各组织,形态结构变化和荧光表达情况,并用PCR和Real-Time PCR方法检测r AAV8-GFP在肾脏、肝脏、脾脏、肺脏和心脏DNA表达情况。结果:与对照组比较,HE染色提示,模型组各脏器组织结构无明显变化。免疫组化提示肝脏有明显绿色荧光蛋白表达,肾脏,脾脏,肺脏和心脏绿色荧光蛋白表达不明显。Real-Time PCR方法发现,与对照组比较,肝脏表达r AAV-8表达最高,心脏,肾脏,肺脏和脾脏都有不同层度表达,但表达水平较低。结论:尾静脉注射r AAV8-GFP造模方法可使r AAV8-GFP在肾组织中有一定程度表达,但表达量偏少,尚不能作为一个较好腺相关病毒在肾脏表达的造模方法。
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单位长征医院; 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院; 中国人民解放军第二军医大学
