重组人精囊蛋白1片段的原核表达及其对精子活率的影响

作者：温彦; 白明星; 旷毓婵; 何畏; 刘威

来源：免疫学杂志, 2015, 31(04): 318-321.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20150067

• 人精囊蛋白1片段
• 原核表达
• 蛋白纯化
• 精子活率

目的通过对人精囊蛋白1(semenogelin I,SEMGI)第165281位氨基酸序列片段(△SEMGI)的原核表达、纯化与鉴定,分析不同质量浓度下的该片段对精子活率影响。方法通过PCR扩增△SEMGI片段目的基因,与p MAL-c2x-tev载体重组;重组质粒转化ROSETTAⅡ后IPTG诱导表达,目的蛋白经过Amylose层析柱、Ni柱、分子筛纯化、免疫印迹法和蛋白质谱分析鉴定。最终,在4个不同蛋白质量浓度下孵育并分析其对人精子活率的影响。结果蛋白质谱分析证实△SEMGI蛋白片段重组成功,其在不同质量浓度下对精子活率均有抑制作用(P<0.05)。结论重组精囊蛋白1的C端片段具有抑制精子活率功能,为进一步研究蛋白结构提供基础。

• 单位
  第三军医大学; 第三军医大学西南医院