WalK(S221P)突变促进金黄色葡萄球菌荚膜产生的作用研究

作者：郭祖文; 饶一凡; 彭华刚; 饶贤才^*

来源：陆军军医大学学报, 2023, 45(23): 2460-2466.

DOI：10.16016/j.2097-0927.202309117

• 金黄色葡萄球菌
• 荚膜
• 二元调控系统WalKR
• WalK(S221P)
• MgrA

目的 探究WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用及可能机制。方法 采用转录组测序(RNA-seq)分析WalK(S221P)突变对金葡菌基因表达的影响，采用RT-qPCR检测荚膜合成基因的表达变化。利用荚膜染色和透射电镜观察确认WalK(S221P)突变促进金葡菌荚膜产生的作用，再用RT-qPCR筛选参与介导WalK(S221P)促进荚膜合成的调控分子，通过结合位点分析和凝胶迁移阻滞实验(EMSA)证实WalKR对目标分子的调控作用。结果 RNA-seq分析显示WalK(S221P)突变对196个金葡菌基因的表达水平影响显著，其中16个荚膜合成操纵子基因在XN108中的表达均显著上调。RT-qPCR检测显示荚膜合成相关capA,capH和capK在含有WalK(S221P)突变的XN108及K-Newman菌株中分别较回复株XN108-R和野生型Newman菌株显著上调。荚膜染色和透射电镜观察显示XN108的荚膜合成相比于回复株XN108-R明显增多，增厚。RT-qPCR筛选提示WalK(S221P)促进金葡菌荚膜合成可能是通过上调MgrA表达水平实现的，结合位点检索分析及EMSA实验证实WalK激活的WalR具有直接结合mgrA基因调控区的功能。结论 金葡菌WalK(S221P)突变具有促进金葡菌荚膜产生的作用，该作用的发挥可能通过上调MgrA的表达而实现。

• 单位
  生物工程学院; 重庆大学; 中国人民解放军陆军军医大学; 第三军医大学; 基础医学院