干扰PD-L1表达对小鼠B细胞淋巴瘤的抑制作用

作者：施青青; 朱淼; 孙幸; 倪军; 孙梅; 顾健; 吴蔚^*

来源：中国实验血液学杂志, 2022, 30(03): 771-777.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2022.03.018

• PD-L1
• RNA干扰
• B系淋巴瘤

目的:探讨干扰PD-L1(programmed death 1-ligad)的表达对抑制小鼠B细胞淋巴瘤的作用。方法:针对C D274(PD-L1)靶基因序列，设计3个RNA干扰靶点序列，连接到pGMVL-SC5干扰载体，瞬时转染293T细胞。RT-q PCR检验各靶点对PD-L1的干扰效率，将干扰效率最佳的shRNA载体进行慢病毒包装，转染A20细胞，获得稳定低表达PD-L1的A20淋巴瘤细胞株(CD274-sh A20)，将A20细胞株和CD274-sh A20细胞株以等数体外培养48 h,MTT法比较体外增殖的差异；同时使用2株细胞分别对免疫功能正常的BALB/c小鼠进行荷瘤，对照组皮下注射等体积PBS缓冲液；通过活体荧光成像评估成瘤情况，记录各组小鼠生存期。结果:CD274-sh A20细胞体外增殖速率显著低于PD-L1高表达的A20细胞(P<0.05)。与普通A20细胞荷瘤组相比，PD-L1干扰荷瘤组小鼠外观及活体荧光成像均可见其瘤体显著缩小。小鼠解剖后称取瘤重，测量瘤体积，结果显示，瘤重及瘤体积明显缩小(P<0.05)。小鼠生存期也较PD-L1高表达组有一定延长。结论:PD-L1在淋巴瘤的发生发展中起到重要作用，干扰其表达能抑制细胞的体外增殖，对于瘤体的生长有一定的抑制作用。

• 单位
  江苏省苏北人民医院