高致病性PRRS VORF3基因在昆虫细胞中的表达与免疫原性研究

作者：**明; 蔡雪辉; 刘永刚; 王淑杰; 王洪峰; 石文达; 李丽琴; 荣福龙

来源：中国预防兽医学报, 2010, (06): 455-459.

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• ORF3
• 杆状病毒表达
• 免疫原性 PRRSV
• Baculovirus expression
• immunogenicity

为进一步研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3的结构、功能和免疫学特性,本研究根据GenBank登录的高致病性PRRSV变异株(HP-PRRSV) HuN4株ORF3基因序列,经序列分析去除其N端的一部分疏水性区域(1aa～49aa),设计合成引物。将扩增的基因连接于pFastBac HTb杆状病毒载体中,构建重组质粒pF-ORF3,转化至感受态DH10Bac中,获得重组杆粒rBac-ORF3。再将其转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rAc-ORF3。用western blot和间接免疫荧光试验(IFA)分析表明GP3在昆虫细胞Sf9中获得正确表达,而且具有良好的反应活性。用纯化的G...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室