儿童急性淋巴细胞白血病IgH基因重排的定量检测研究

作者：崔蕾; 李志刚; 高超; 吴敏媛

来源：中华检验医学杂志, 2007, 30(10): 1119-1122.

DOI：10.3760/j.issn:1009-9158.2007.10.010

• 白血病,淋巴细胞,急性
• 肿瘤,残余
• 免疫球蛋白类,重链
• 基因重排

目的建立免疫球蛋白重链(IgH)的实时定量(RQ)-PCR 检测体系,以用于儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留病(MRD)检测。方法采用定性 PCR 筛选109例儿童 B 细胞 ALL(B-ALL)IgH 基因单克隆重排,根据连接区序列设计等位基因特异性引物,应用 RQ-PCR 技术,采用胚系 Taqman 探针与引物,在41例患儿中建立 RQ-PCR 定量检测方法,并分析其敏感度、特异性等。结果109例儿童 B-ALL 初诊标本中 IgH 单克隆重排有48例,经测序分析发现,V、D、J 片段频率最高的分别为 V3家族、D3家族和 J4家族。RQ-PCR 方法扩增48例 IgH 单克隆重排的初诊 DNA,其中41例可重复敏感度和最大敏感度均≤10~(-4),非特异性扩增的循环阈值(Ct 值)均>40,与特异性扩增 Ct值的差距均>3。标准曲线斜率均值为-3.31±0.19,截距均值为37.66±1.23,相关系数均为0.97以上。结论以 IgH 基因重排为靶分子,采用 RQ-PCR 方法和胚系探针策略检测儿童 B-ALL,敏感性≤10~(-4),并具有较高的特异性,适于 MRD 的定量研究。

• 单位
  首都医科大学附属北京儿童医院