PAG1与整合素β1的相互作用及其位点分析

作者：沈力; 彭峰; 柯青; 邱力

来源：湖北医药学院学报, 2018, 37(03): 199-194.

DOI：10.13819/j.issn.1006-9674.2018.03.001

• PAG1
• 整合素β1
• 多肽阵列
• 结合基序

目的:在原发性放射抵抗喉癌细胞中分析鞘糖脂微结构域1相关磷酸化蛋白(PAG1)与整合素β1的相互作用情况,并探讨PAG1与整合素β1的结合基序。方法:提取Hep-2max细胞总蛋白,采用免疫共沉淀技术检测PAG1、整合素β1相互作用;进一步运用多肽阵列技术在聚乙二醇(PEG)修饰纤维素膜上合成覆盖PAG1蛋白全部序列的多肽阵列,包含7个重复氨基酸,多肽长度为12个氨基酸,将阵列与整合素β1重组蛋白孵育,通过整合素β1特异抗体检测,使用TotalLab软件分析各点光密度。结果:PAG1免疫沉淀复合物中检测到整合素β1,整合素β1免疫沉淀复合物中检测到PAG1;PAG1多肽阵列两个区域存在阳性结合反应,分别位于Pro216-Arg232和Asn356-Gly377之间。结论:PAG1与整合素β1的相互结合在喉癌原发性放射抵抗中发挥重要作用。

• 单位
  十堰市太和医院; 湖北医药学院; 基础医学院; 生物化学教研室