辛伐他汀通过磷酸化作用增强内皮一氧化氮合酶活性

作者：李小霞; 夏勇; 汪道文

来源：中国分子心脏病学杂志, 2007, (05): 253-259.

DOI：10.16563/j.cnki.1671-6272.2007.05.012

• 辛伐他汀
• G418
• eNOS
• 人胎肾细胞株
• 脂质体转染

目的建立含人内皮一氧化氮合酶(eNOS)基因的人胎肾细胞株,研究他汀类药物对eNOS活性的影响。方法用脂质体转染的方法将含有eNOS基因的质粒pcDNA3.1-eNOS导入人胎肾细胞(293细胞),利用G418筛选二次,以免疫印迹法鉴定并筛选出稳定表达eNOS的阳性克隆。将辛伐他汀(10μmol/L)加入eNOS阳性细胞系培养2h后,收获细胞并用同位素二步色谱法检测eNOS的活性,同时用Western Blot蛋白检测eNOS、磷酸化的eNOS表达水平和细胞内信号分子Akt、AMPK水平以探讨辛伐他汀调节eNOS活性的机制。结果Western Blot显示经转染pcDNA3.1-eNOS并筛选后的后的293细胞20%的克隆能稳定有效表达eNOS蛋白;辛伐他汀处理2h后eNOS活性明显升高(P<0.05)。结论成功建立了具有G418抗性的禽pcDNA3.1-eNOS基因的人胎肾细胞株,并且证明辛伐他汀可通过调节eNOS的活性来调节NO的生成,这可能为心血管疾病的治疗提高一种新的思路。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院