摘要

以绒毛白蜡幼苗为试材,Illumina HiSeq 2000高通量测序技术获得的绒毛白蜡转录组Unigene数据为基础,采用RT-PCR方法克隆绒毛白蜡A20/AN1型锌指蛋白基因FvSAP1编码区序列,并通过双酶切等技术构建pCAMBIA2300-FvSA P1植物表达载体。结果表明,从绒毛白蜡中成功克隆出1个A20/AN1型锌指蛋白基因FvSA P1的编码区序列,且成功构建了pCAMBIA2300-FvSA P1植物表达载体。基因编码区长度为846bp,可编码281个氨基酸,分子量为31.0kDa,等电点为8.34,原子总数为4269个,分子式为C1332H2106N400O407S24。蛋白质序列分析表明,FvSAP1具有两个AN1锌指结构,其序列模式为C-X4-C-X(9-12)-C-X(1-2)-C-X4-C-X2-H-X5-H-X-C。Blast 分析表明FvSA P1与芝麻(Sesamum indicum,XP011075237.1)SiSAP 16序列的相似性最高,序列一致性为78%。将FvSAP1与同类型的锌指蛋白进行多重序列比较,结果显示该类蛋白序列在不同物种之间具有较高的保守性。