内皮祖细胞损伤来源微粒对内皮祖细胞的影响机制研究

作者:马艺萍; 阿不都热合曼·米吉提; 袁玉娟; 吐尔孙阿依·依斯米提拉; 阿卜拉江·艾合麦提; 穆叶赛·尼加提*
来源:重庆医学, 2023, 52(23): 3538-3545.

摘要

目的 研究不同损伤处理的内皮祖细胞(EPC)来源微粒(MPs)对EPC的影响。方法 培养EPC并使用流式细胞术鉴定,用高糖(HG)、肿瘤坏死因子(TNF)-α重组蛋白处理EPC,进而提取MPs。用透射电镜观察EPC内微管、高尔基体等细胞器的结构变化,MTT检测细胞增殖情况,细胞划痕实验评价细胞迁移能力,细胞管腔形成实验检测管腔形成情况。用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测不同处理后EPC中内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、沉默信息调节因子1(SIRT1)、大鼠肉瘤(RAS)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)的表达水平。结果 与control-EPC-MPs组比较,HG-EPC-MPs组、TNF-α-EPC-MPs组微管结构完整,长度有所缩短,高尔基体结构相对完整。与control-EPC-MPs组比较,HG-EPC-MPs组、TNF-α-EPC-MPs组EPC增殖率下调,细胞迁移能力降低,成管减少(P<0.05)。与control-EPC-MPs组比较,HG-EPC-MPs组、TNF-α-EPC-MPs组eNOS、SIRT1、RAS和ERK的mRNA及其蛋白表达下调(P<0.05)。结论 HG和TNF-α介导EPC损伤来源的MPs可能通过调控SIRT1/ERK1通路蛋白的表达,使EPC内含细胞器的结构改变,从而影响EPC的生物学功能。