大熊猫白血病抑制因子RNAi干扰载体的构建及应用

作者：李非平; 刘玉良; 王神飞; 张梦诗; 胡贤彪; 安俊辉; 王东辉; 张名岳; 侯蓉; 蔡开来^*

来源：西南民族大学学报(自然科学版), 2023, 49(06): 609-615.

• 大熊猫
• LIF
• 骨髓间充质干细胞

旨在构建大熊猫白血病抑制因子(LIF)RNAi重组质粒，以期进一步研究LIF对大熊猫骨髓间充质干细胞(PDBM-MSCs)的调控作用.试验设计3组大熊猫LIF shRNA慢病毒pLKO.1 puro-LIF-down干扰载体，通过慢病毒的方式感染PDBM-MSCs,经q-PCR鉴定重组质粒pLKO.1 puro-LIF-down-1抑制效果最显著.pLKO.1 puro-LIF-down-1实验组和空质粒对照组比较发现，LIF mRNA表达水平抑制后能够显著下调细胞周期调控基因CDK2、CCNB2、CCND3的mRNA表达水平(P<0.05);显著上调凋亡基因P53、P16、P27、caspase3的mRNA表达水平(P<0.05);显著下调干性基因KLF4、SOX2的mRNA表达水平(P<0.05).以上结果表明，此次研究成功构建出大熊猫LIF RNAi干扰载体，LIF对PDBM-MSCs的生长和干性维持具有重要的调控作用，为大熊猫干细胞的体外培养及干性机制的研究奠定基础.

• 单位
  四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室; 成都大熊猫繁育研究基地