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摘要
[目的]探讨磷酸酶PHLPP2在铁死亡诱导剂RSL3诱导非小细胞肺癌细胞铁死亡发生中的作用及机制。[方法]体外培养人肺癌细胞株，GPX4抑制剂RSL3处理后MTT法检测RSL3抑制非小细胞肺癌细胞增殖作用，实时荧光定量PCR检测mRNA水平，Western blot法检测蛋白表达。流式细胞术检测脂质ROS水平，分别采用逆转录病毒/腺病毒感染上调/下调PHLPP2表达，两组间比较采用独立样本t检验。[结果] RSL3有效抑制非小细胞肺癌细胞的活力，RSL3处理后HCC827、H1975、H1650、A549和H1299细胞的增殖率分别为15.22%±2.35%、 25.05%±5.92%、 4.40%±1.61%、41.48%±10.01%和13.17%±2.54%。PHLPP2表达水平最高的H1650细胞对RSL3抑制增殖作用最显著，RSL3抑制增殖作用与PHLPP2表达水平呈正比。上调PHLPP2表达可以增加RSL3对A549细胞增殖抑制作用，并增加铁死亡关键标志脂质ROS的累积，A549-vector和A549-PHLPP2组的脂质ROS水平分别为4.34%±0.39%和15.36%±0.80%(P<0.001)；相反，下调PHLPP2表达H1650细胞中，RSL3对H1650细胞增殖抑制作用减弱，减少了其诱导的脂质ROS的累积，H1650-shControl和H1650-shPHLPP2脂质ROS水平分别为14.76%±1.22%和4.89%±1.81%(P=0.0 015)。公共数据库挖掘分析PHLPP2与铁死亡关键蛋白GPX4、SLC7A11和ASCL4的相关性，发现PHLPP2与GPX4表达呈负相关（r=-0.336,P<0.001）。Western blot进一步验证了上调PHLPP2表达可增强RSL3对GPX4蛋白的抑制作用。[结论] PHLPP2促进GPX4抑制剂RLS3诱导铁死亡发生，其机制主要通过协同抑制GPX4活性。
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