超高效液相色谱-串联质谱法测定小鼠纹状体中多巴胺及其代谢物的含量

作者：梁金良; 陈晓彤; 胡坤华^*

来源：理化检验. B, 化学分册, 2023, 59(12): 1381-1387.

• 超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)
• 多巴胺及其代谢物
• 帕金森病
• 小鼠纹状体

提出了超高效液相色谱-串联质谱法同时测定小鼠纹状体中多巴胺(DA)及其代谢物高原儿茶酸(DOPAC)与高香草酸(HVA)含量的方法。取小鼠纹状体约10 mg,用200μL 2%(体积分数)甲酸溶液提取、离心。取上清液80μL,加入40μg·L-1异丙肾上腺素(内标)溶液10μL和含0.1%(体积分数，下同)乙酸的甲醇溶液10μL,涡旋混匀，再加入100μL甲醇，涡旋、离心。上清液中DA及其代谢物在Gemini NX-C18色谱柱上分离，以不同体积比的0.1%乙酸溶液和含0.1%乙酸的甲醇溶液混合液为流动相进行梯度洗脱，质谱分析采用电喷雾离子源正、负离子模式，选择反应监测(SRM)模式扫描。结果表明，3种目标物在7.00 min内能完成测定。DA、DOPAC和HVA标准曲线的线性范围分别为0.05～100,0.5～1 000,0.25～500μg·L-1,检出限分别为0.015,0.150,0.075μg·L-1。按照标准加入法进行回收试验，回收率为84.4%～117%,日内精密度和日间精密度试验所得测定值的相对标准偏差均小于15%。质控样品在自动进样器中保存8 h、4℃保存24 h以及-80℃保存30 d前后3种目标物测定值的相对误差绝对值不大于20%,说明样品稳定性良好。

• 单位
  中山大学附属第三医院; 中山大学中山医学院