牛源致脑炎大肠杆菌多表位抗原的制备及免疫效果的初步评价

作者：海永慧; 钦倩; 李蓓蓓; 任静静; 马勋; 王鹏雁^*; 蒋建军

来源：石河子大学学报(自然科学版), 2022, 40(02): 193-197.

DOI：10.13880/j.cnki.65-1174/n.2022.22.018

• 牛源致脑炎大肠杆菌
• B细胞表位
• 原核表达
• 免疫保护效果

目的 为了初步评价基于FimD、PilN和PilV蛋白优势表位设计的重组蛋白免疫保护效果。方法 将FimD、PilN和PilV蛋白的优势B细胞表位串联，构建原核表达载体，然后在BL21(DE3)大肠杆菌中进行原核表达及纯化；用弗氏佐剂与重组蛋白充分混匀后免疫小鼠，收集血清，利用间接ELISA方法检测抗体效价，并进行抗原性的检测；三免后进行攻毒保护实验并对小鼠肝脏、脑和脾脏载菌量进行测定。结果 重组蛋白主要以包涵体形式表达。Western-blot结果显示出现一条特异性条带，与预期的重组蛋白大小相符，表明成功制备出多表位抗原。重组蛋白免疫小鼠后血清特异性抗体效价高达1:204 800。试验组小鼠攻毒后存活率为66%,对照组小鼠肝脏、脑和脾脏载菌量均显著高于试验组。结论 重组蛋白具有良好的抗原性和一定的免疫保护作用，具有研发牛源致脑炎大肠杆菌多表位疫苗的潜在价值。

• 单位
  石河子大学; 动物科技学院