摘要
目的 探讨瞬时受体电位通道7 (TRPM7)在癫痫中与凋亡的关系。方法 采用CCK-8法检测匹鲁卡品(PILO)对Neuro-2A细胞活性的影响;设置对照组和PILO模型组,采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和细胞色素C蛋白(Cyt C)的表达;采用实时荧光定量PCR法检测TRPM7 mRNA的表达;设置对照组(Neuro-2A细胞转染无序siRNA序列)、PILO模型组(Neuro-2A细胞转染无序siRNA序列后经PILO处理24 h)和PILO+siRNA组(Neuro-2A细胞转染TRPM7 siRNA序列后经PILO处理24 h),采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白表达;采用TUNEL染色观察细胞凋亡情况。结果 Neuro-2A细胞活性随PILO浓度升高而降低;与正常对照组相比,模型组凋亡相关蛋白caspase-3、Bax、Cyt C和TRPM7mRNA在24 h时表达明显增加(均P <0.05);与PILO模型组相比,PILO+siRNA组凋亡相关蛋白caspase-3、Bax和Cyt C表达和细胞凋亡率明显减少(均P <0.05)。结论 TRPM7参与PILO诱导的癫痫体外模型的凋亡。
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单位中国医科大学; 中国医科大学附属第四医院