干旱诱导基因GmNF-YA7克隆及植物表达载体构建

作者：殷书欣; 计俊杰; 肖情; 李铭杨; 何佳琦; 张军; 翟莹^*

来源：大豆科学, 2022, 41(01): 43-48.

• 大豆
• GmNF-YA7
• 干旱响应
• 植物表达载体
• 转基因工程菌

为了鉴定大豆核因子YA(Nuclear Factor YA, NF-YA)与非生物胁迫的关系,本研究检测大豆干旱胁迫下GmNF-YA7和GmNF-YA8的表达量情况,克隆GmNF-YA7基因并构建植物表达载体,同时获得其转基因工程菌株。qRT-PCR结果显示,GmNF-YA7和GmNF-YA8均可以被干旱胁迫诱导表达,且GmNF-YA7对干旱胁迫的应答更明显。从大豆中克隆出GmNF-YA7基因,其位于大豆8号染色体上,编码含有336个氨基酸的蛋白质,预测分子量为37.06 kDa, pI6.11。GmNF-YA7蛋白氨基酸序列中含有1个CBF保守结构域。亚细胞定位预测结果显示,GmNF-YA7定位于细胞核中。蛋白系统进化分析表明GmNF-YA7蛋白与拟南芥AtNF-YA1蛋白的亲缘关系较近。利用限制性内切酶Nde I和Sal I将GmNF-YA7与植物表达载体pRI101连接并转化农杆菌EHA105,获得转基因工程菌株。

• 单位
  黑龙江省农业科学院; 齐齐哈尔大学