牛支原体Vsp蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备

作者：徐佳; 孙怀昌^*

来源：河南农业科学, 2023, 52(12): 142-148.

DOI：10.15933/j.cnki.1004-3268.2023.12.016

• 牛支原体
• 可变表面脂蛋白
• 原核表达
• 单克隆抗体

为研发牛支原体的快速诊断试剂，利用大肠埃希菌原核表达系统表达重组Ca Ig V-Vsp蛋白，制备Ca Ig V-Vsp蛋白单克隆抗体。结果显示，成功构建了重组质粒p ET-Ca Ig V-Vsp;SDS-PAGE电泳结果显示，融合蛋白为可溶性蛋白；ELISA与Western blot检测结果显示，重组Ca Ig V-Vsp蛋白与牛支原体阳性血清可发生特异性反应，具有较好的免疫原性；成功制备了4株稳定分泌Ca Ig V-Vsp蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，腹水ELISA效价分别为5.2×105、1.3×105、2.6×105、2.6×105。

• 单位
  江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 扬州大学