稳定表达人MAGE-1基因的小鼠细胞系的建立与鉴定

作者：何竞张贺秋冯晓燕宋晓国王国华凌世淦

来源：军事医学科学院院刊, 2005, (05): 40-42+47.

• 黑素瘤
• 克隆
• 真核细胞
• 基因表达
• 小鼠
• 转基因 melanoma
• cloning
• eukaryotic cells
• gene expression
• mice
• transgenic

目的:克隆人黑素瘤抗原-1(MAGE-1)基因,构建真核表达载体,建立稳定表达人MAGE-1的小鼠细胞株。方法:提取人肝癌细胞的总RNA,RT-PCR法获得人MAGE-1 cDNA,将测序正确的MAGE-1基因克隆至真核表达载体pcDNA3中,进行酶切鉴定和序列测定。将重组质粒pcDNA/MAGE和空载体pcDNA3分别转染入小鼠骨髓瘤细胞SP2/0中,经G418筛选获得稳定表达株,用RT-PCR和W estern印迹检测MAGE-1基因的转录及蛋白表达。结果:从肝癌细胞中成功克隆到人MAGE-1基因,经测序证明基因正确,酶切和序列测定表明,人MAGE-1基因的真核表达质粒已成功构建。将此重组...

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所