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摘要
【目的】研究猪类无精症缺失基因DAZL在版纳微型猪近交系（Banna mini-pig inbred line, BMI）中的启动子特征、转录表达及蛋白功能。【方法】使用PCR技术克隆DAZL启动子序列，并分析其结构；使用RNA测序技术获得BMI睾丸组织中DAZL的表达量，并构建转录调控网络；分析DAZL的氨基酸同源性与蛋白功能特性，并构建互作蛋白网络。【结果】成功扩增了DAZL长度为2 378 bp的启动子序列，含1个CpG岛、3个核心启动子以及Oct-1、Sp1、Pit-1a等10种转录因子结合位点；DAZL在BMI睾丸组织中有较高的正表达；ceRNA调控网络分析表明DAZL被sscmiR-199a-5p、ssc-miR-199b-5p、ssc-miR-17-5p、ssc-miR-103、ssc-miR-24-3p和ssc-miR-107等6个miRNAs靶向调控；功能注释发现其主要在精子发生、生殖细胞发育、翻译调控中发挥重要功能。DAZL及其邻近基因分析发现其在各物种中高度保守，且具有较为保守的邻近基因；蛋白互作网络、GO和KEGG富集分析显示DAZL与PUM2、DAZAP2和SYCE1等多个蛋白互作，主要参与精子发生、卵子发生、有性生殖等重要生殖相关通路；转录组数据与蛋白编码基因之间的表达量相关性显示DAZL的表达量与SOHLH1显著相关。【结论】本研究从DNA、RNA和蛋白质角度全面分析了猪DAZL的启动子结构、转录表达和蛋白功能，结果为更进一步研究DAZL在精子发生中的作用奠定了基础。
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单位云南农业大学; 吕梁学院
