摘要
采用改进的胶原酶灌注方法结合Percoll密度梯度离心加anti-LSE Cmicrobeads免疫磁珠分离纯化小鼠肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSECs),台盼蓝染色测定细胞活力,光镜下观察培养细胞的形态学变化,流式细胞仪分析其纯度,RT-PCR方法检测其新的特征性分子LSECtin基因的表达。结果表明:此方法分离的小鼠LSECs得率为(5±0.2)×106个/只小鼠,台盼蓝染色活力≥95%,流式细胞仪分析其纯度达到91.92%,光镜下观察细胞形态典型,RT-PCR检测到新的特征分子LSECtin基因的表达。本研究建立了一种小鼠LSECs的分离、纯化、培养及鉴定方法,为其功能和作用机制的深入研究打下了基础。
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单位军事医学科学院放射与辐射医学研究所; 蛋白质组学国家重点实验室; 湖南农业大学; 北京蛋白质组研究中心